摘要：本实验以聚乙烯醇、海藻酸钠及活性炭三种材料为载体，对假丝酵母进行联合固定化。研究了固定化假丝酵母在不同因素下，对产3-羟基丙酸的影响，主要的因素为发酵液的pH，接种量，固定化假丝酵母的保藏温度以及发酵次数等。

实验结果表明：当发酵液的pH为5-7时，3-羟基丙酸含量在12.22g/L-21.17g/L之间，产量较为稳定。且在pH6时，3-羟基丙酸含量最高，为21.17g/L。当接种量在10-15mL之间时，3-羟基丙酸含量在12.64g/L-21.57g/L之间，产量较稳定；增加接种量至30mL，3-羟基丙酸产量下降明显。固定化假丝酵母4℃下保藏一周后发酵与直接发酵相比，3-羟基丙酸产量下降约11%左右。当重复使用同一批固定化假丝酵母发酵时，第一次、第二次、第三次发酵后，3-羟基丙酸含量分别为13.67g/L、6.21g/L、5.47g/L，后两次下降明显，但趋于稳定。

关键词：固定化；假丝酵母；因素；影响

目录

摘要

Abstract

1.绪论-1

1.1假丝酵母的概述-1

1.2 3-羟基丙酸的研究进展-1

1.3细胞固定化技术-2

1.3.1交联法-2

1.3.2吸附法-2

1.3.3共价结合法-2

1.3.4包埋法-3

1.4影响固定化细胞发酵的因素-3

1.4.1发酵液的pH-3

1.4.2接种量-3

1.4.3低温保藏固定化细胞-4

1.4.4固定化细胞发酵次数-4

1.5固定化细胞技术的前景-4

1.5.1工业上的应用-4

1.5.2环境保护的应用-4

1.6研究的目的及意义-5

2.材料和方法-6

2.1材料和试剂-6

2.1.1主要材料-6

2.1.2主要试剂-6

2.1.3实验设备-7

2.2实验方法-7

2.2.1培养基-7

2.2.2假丝酵母的扩大培养-7

2.2.3固定化细胞的制备-7

2.2.4发酵液pH对固定化假丝酵母的影响-8

2.2.5接种量对固定化假丝酵母的影响-8

2.2.6低温保藏对固定化假丝酵母的影响-8

2.2.7发酵次数对固定化假丝酵母的影响-8

2.3 3-羟基丙酸的测定-8

2.3.1标准品3-羟基丙酸的测定-8

2.3.2样品中的3-羟基丙酸的测定-8

3.结果与讨论-10

3.1高效液相色谱条件的优化-10

3.2制作3-羟基丙酸标准曲线-10

3.3游离假丝酵母产3-羟基丙酸的测定-11

3.4 pH对固定化假丝酵母的影响-11

3.5接种量对固定化假丝酵母的影响-12

3.6低温对固定化假丝酵母的影响-14

3.7发酵次数对固定化假丝酵母的影响-15

结论-17

致谢-18

参考文献-19