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摘 要:药食两用植物蓝布正(Geum japonicum Thunb. var. chinense F. Bolle),又名追风七(陕西),是蔷薇科路边青属植物,在全国各地均有分布。在贵州少数民族地区,蓝布正是当地常食用的野菜,另外也广泛用于治疗头晕目眩、头痛等症状。蓝布正中富含三萜类和鞣质类成分,其中三萜类成分具有突出的降血压、血糖、血脂的功效,然而目前尚未有蓝布正中三萜类成分提取方法的研究。本文以蓝布正为原料,探讨了蓝布正中三萜化合物的提取工艺,在该提取工艺下的多酚含量以及分别在化学和细胞水平上研究了蓝布正提取物的抗氧化活性。通过以上研究,初步确定了蓝布正中三萜类物质的最佳提取工艺,并且在此基础上研究了抗氧化活性得出了结果。 利用实验设计软件Design-Expert 8.0.4,使用三因素正交的方法,采用Box-Behnken建立了乙醇浓度提取时间和料液比与三萜化合物得量之间的二次多项数学模型,利用其响应面对影响三萜化合物提取量的关键因素及其相互作用进行探讨,优化出蓝布正中三萜化合物提取的最佳条件为乙醇体积分数82.26%、提取温度80 ℃、提取时间51.53 min、料液比25: 1(g/mL)。三萜化合物得量预测值108.025 mg。用优化后条件进行验证试验,测出三萜化合物得量为106.84 mg,证明模型是合理可靠的,可用于实际预测。 细胞水平上的抗氧化活性研究实验结果显示,与H2O2损伤组相比,低、中、高浓度的蓝布正三萜皂苷提取物(GJ)及Nigaichigoside F1(NF)均能显著升高细胞存活率(P < 0.05),极显著降低H2O2诱发的ROS损伤水平(P < 0.01),并具有一定浓度依赖性。MDA是脂质过氧化最重要的产物之一,是表征细胞氧化应激状态的重要指标。实验结果表明,与H2O2损伤组相比,给予不同浓度的GJ及NF均能有效降低细胞内的MDA水平。总抗氧化能力(T-AOC)及抗氧化酶SOD、GSH-Px、CAT是生物机体中重要的抗氧化酶系,构成机体清楚自由基的第二道防线。实验结果表明,H2O2诱导细胞氧化损伤,降低细胞内的T-AOC、SOD、GSH-Px、CAT等抗氧化酶水平,给予不同浓度的GJ和NF预先保护细胞,可显著提高细胞内的抗氧化酶水平,并呈现出一定的浓度依赖性。综合上述实验结果,表明蓝布正三萜皂苷提取物、Nigaichigoside F1具有较强的抗氧化能力,可有效调节细胞的氧化应激水平。 当提取物浓度为0.5mg/mL时,蓝布正提取物对DPPH的抑制率高达90%以上,具有较高的抗氧化活性,随着溶液浓度的降低,蓝布正提取物对DPPH的抑制率逐渐降低,有一定的浓度依赖性。 本实验结果将为蓝布正抗氧化活性成分的下一步研究提供科学依据,为进一步开发利用本植物奠定实验基础。
关键词:蓝布正,三萜,提取,抗氧化 |