摘要：本文采用植物基因组提取方法对山药的基因组DNA进行提取，利用PCR技术对其18S rDNA片段进行扩增，再经连接、转化、筛选、测序，获得长度为1646 bp的18S rDNA序列。提交该序列至GenBank数据库，获得基因登录号JF703101。分析山药18S rDNA的基因序列，确定山药与烟草和番茄等多种植物在分类上有很近的关系，从而对分子水平上山药分类有了进一步了解。

关键词： 山药；18S rDNA；遗传多样性

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 山药与山药产业-1

1.1.1 山药的性质与功用-1

1.1.2 山药产业的发展状况-3

1.2 山药研究进展-4

1.2.1 国内山药研究的发展趋势-4

1.2.2 国外研究进展-5

1.3 植物DNA与DNA序列分析-5

1.3.1 植物DNA特点-5

1.3.2 核糖体DNA结构-5

1.3.3 rDNA序列分析的应用-6

1.4 本课题相关技术与原理-6

1.4.1 植物细胞破碎方法-6

1.4.2 植物基因组DNA提取方法-6

1.4.3 基因组DNA的检测方法-7

1.4.4 聚合酶链式反应原理-8

1.4.5 质粒的提取方法-8

1.4.6 感受态与转化原理-8

1.5 目的与意义-9

2 材料与方法-10

2.1 仪器与试剂-10

2.1.1 材料与试剂-10

2.1.2 主要仪器设备-10

2.2 实验方法-11

2.2.1 山药基因组DNA的提取-11

2.2.2 电泳鉴定-12

2.2.3 山药18S rDNA PCR扩增反应体系-12

2.2.4 DNA回收-12

2.2.5 构建重组载体-13

2.2.6 化学转化-13

2.2.7 重组质粒的提取及鉴定-14

2.2.8 18S rDNA序列测定和分析-14

3 结果与讨论-15

3.1结果-15

3.1.1 山药核糖体DNA的电泳-15

3.1.2 山药核糖体18S rDNA序列的测定-15

3.1.3 相关植物核糖体18S rDNA序列-16

3.1.4 相关植物的传统分类-17

3.2 讨论-17

3.2.1 核糖体DNA提取方法-17

3.2.2 电泳方法-17

3.2.3 山药系统演化-18

结论-19

致谢-20

参考文献-21