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摘要:本研究以薰衣草花茶为原料,采用70%丙酮-水,按料液比1:15及40℃下对原料中的多酚物质进行粗提,再用乙酸乙酯按体积比1:4萃取,首先分离提取得到水相与EA相多酚提取物。然后以呋喃丙烯酰三肽(FAPGG)为底物,考察了用HPLC法研究血管紧张素酶抑制活性的实验条件,并对比了薰衣草多酚不同提取物的ACE酶抑制作用,结果表明:与薰衣草多酚的水相提取物相比,EA相的ACE抑制效果较好;EA相主要成分迷迭香酸有不错的ACE抑制效果,其IC50值为3.3147 mmol/L。最后以卡托普利(Captopril)为对照,验证了该方法的可行性。 关键词:薰衣草多酚 ACE酶抑制 迷迭香酸 HPLC法
目录 摘要 ABSTRACT 1 前言-4 1.1 薰衣草简介-4 1.2 薰衣草多酚的研究进展-4 1.3 血管紧张素转化酶(ACE)及其抑制作用研究-4 1.4 本文研究内容及目的-5 2 实验材料与方法-6 2.1实验材料与试剂-6 2.2实验器材-6 2.3实验方法-6 2.3.1 薰衣草多酚类物质的提取-6 2.3.1.1 粗提-6 2.3.1.2 薰衣草多酚的萃取分离-7 2.3.2 ACE酶抑制的测定方法-7 2.3.2.1 高效液相色谱法-7 2.3.2.2 抑制率计算方法-7 2.3.3 酶活力和反应时间的确定-8 2.3.3.1 试剂准备-8 2.3.3.2 实验方法-8 2.3.4 ACE与FAPGG添加顺序的考察-9 2.3.5 卡托普利对于方法的验证-9 2.3.6 薰衣草花茶多酚提取物EA萃取相与水相的ACE酶抑制活性测定-9 2.3.7 迷迭香酸的ACE酶抑制活性测定-10 3 实验结果与讨论-10 3.1 薰衣草多酚粗提液的成分分析-10 3.2 经乙酸乙酯萃取后的水相及EA相的成分分析-11 3.3 以FAPGG为底物的ACE酶抑制作用的HPLC法优化结果-13 3.3.1 ACE酶活控制-13 3.3.2 酶反应液ACE酶添加顺序-14 3.4 卡托普利的酶抑制活性-15 3.5 EA相与水相的酶抑制活性比较-16 3.6 迷迭香酸的酶抑制活性-18 4 结论-20 5 参考文献-21 |