摘要:本研究采用可视化蛋白芯片法检测牛奶中三聚氰胺的含量，并通过与ELISA试剂盒检测牛奶中三聚氰胺含量的比较来验证蛋白芯片法的可行性。针对检测对象三聚氰胺为小分子的特点，用间接竞争免疫法进行检测，微孔板芯片上固定三聚氰胺抗原，再在芯片反应区内加入三聚氰胺单克隆抗体和游离的三聚氰胺或牛奶样品混合物，游离的三聚氰胺会与固定的三聚氰胺竞争结合抗体。待抗原抗体反应完全后加入胶体金标记的二抗（羊抗鼠IgG），最后加入银增强显色剂进行可视化检测。待显色完毕，用平板扫描系统获取信息，最后用相关软件提取数据进行定量分析。根据不同浓度的游离三聚氰胺与检测的信号强度作标准曲线，可定量检测游离的三聚氰胺的含量。结果表明标准曲线相关系数R2>0.99，样品的加样回收率85%~130%，检测限为13.4 ng/ml,低于国家规定的允许残留量1000 ng/ml。

关键词： 蛋白芯片； 可视化检测； 三聚氰胺； 牛奶。

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摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1三聚氰胺的介绍-1

1.2三聚氰胺检测方法-2

1.3展望-3

2 实验材料和方法-5

2.1实验材料和器材-5

2.1.1实验仪器及耗材-5

2.1.2实验试剂-5

2.1.3主要溶液配制-5

2.2实验原理及步骤-6

2.2.1实验原理-6

2.2.2实验方法与步骤-6

3 实验结果与讨论-8

3.1三聚氰胺抗原、抗体浓度的筛选-8

3.2标曲的建立-9

3.3加样回收率的计算-12

3.4检测限实验-15

3.5准确度实验-16

4 结论-19

参考文献-20

致    谢-21