摘要:采用银杏外种皮作为原料，通过筛选，挑选出枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌混合发酵，制备复合酶饲料添加剂，优化发酵条件，得到最佳发酵工艺参数，并测定研究发酵产物的主要营养成分和活性物质。实验结果得出的最佳发酵条件为：固液比为1:1，初始pH为6.0，发酵温度为37 ℃，发酵时间为72 h。在此条件下进行发酵，发酵结果较好。在对发酵产物主要营养成分和生物活性物质分析后发现黄酮含量提高了0.35%。内酯含量提高了0.58%，蛋白质含量由原先的10.65%增加到21.79%。根据上述数据发现通过微生物固体发酵银杏外种皮，使其具有更丰富的营养价值和更强的生物活性能力。

关键词 银杏外种皮；固体发酵；发酵条件优化

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 银杏外种皮研究现状-1

1.1.1 银杏外种皮化学成分研究现状-1

1.1.2 银杏外种皮的药用价值-2

1.2 益生菌-3

1.2.1 益生菌的生理功能-3

1.2.2芽孢杆菌的作用原理-3

1.2.3 芽孢杆菌特征和用途-4

1.3饲料添加剂研究现状-4

1.4固体发酵-5

1.5 研究的目的与意义-5

2材料与方法-6

2.1 菌种-6

2.2 主要仪器-6

2.3 主要材料及试剂-6

2.4 银杏外种皮处理-6

2.4.1银杏外种皮的处理-6

2.4.2银杏外种皮中水分测量-7

2.5 培养基-7

2.6 培养方法-7

2.6.1 菌种的活化-7

2.6.2 革兰氏染色镜检-7

2.6.3 固体发酵-8

2.7 菌种筛选-8

2.7.1菌种复活-8

2.7.2 不同搭配的菌种筛选-8

2.8 分析测定方法-8

2.8.1 还原糖含量和总糖含量的测定方法-8

2.8.2 CMC酶活和半纤维素酶活的测定-11

2.8.3 银杏黄酮含量测定方法-11

2.8.4 银杏内酯含量测定方法-14

2.8.5蛋白质含量测定方法-18

2.9单因素优化-20

2.9.1接种量对产酶的影响-20

2.9.2 固液比对产酶的影响-20

2.9.3 培养基的初始pH对产酶的影响-20

2.9.4 发酵时间对产酶的影响-21

2.9.5 发酵温度对产酶的影响-21

2.9.6正交试验优化-21

2.9.7 验证实验-21

2.10 主要营养成分和生物活性成分含量分析-21

3结果与讨论-22

3.1银杏外种皮水分测定-22

3.2 筛选-22

3.2.1 芽孢杆菌革兰氏染色结果-22

3.2.2 不同菌种搭配的筛选结果-22

3.3 发酵条件的优化-24

3.3.1 接种量的影响-24

3.3.2 固液比的影响-25

3.3.3 初始pH的影响-26

3.3.4 发酵时间的影响-28

3.3.5发酵温度的影响-29

3.3.6 发酵条件的正交试验-30

3.4发酵产物营养成分与生物活性成分分析-32

3.4.1银杏黄酮的含量-32

3.4.2银杏内酯的含量-33

3.4.3蛋白质的含量-33

结论-35

致谢-36

参考文献-37