摘要:幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)是引起胃炎、消化道溃疡等胃肠疾病的主要原因。本文以幽门螺杆菌菌株裂解物作为抗原，刺激产蛋鸡，使之产生特异性抗体；免疫后，采集被免鸡的血，用酶联免疫法（ELISA）测定其血清中IgG的效价。免疫后收集鸡蛋，应用改进的硫酸铵沉淀法提纯蛋黄中的卵黄抗体。用聚丙烯酰胺凝胶电泳SDS-PAGE法测定提取出的卵黄抗体。用薄层扫描分析测定各个纯化阶段中样品的纯度，纯度达到80%。再测定纯化后卵黄抗体的效价，测得纯化后的抗HP-IgY效价滴度达到52000。同时对IgY稳定性进行检测，确定了抗体在不同温度及不同pH等环境因素影响下的活性范围，对应用IgY进行抗体治疗相关疾病起到指导作用。

关键词 幽门螺杆菌；卵黄抗体；抗体效价；纯度；稳定性

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

 1.1 概述-1

1.1.1 免疫球蛋白的研究进展-1

1.1.2 卵黄抗体的分子结构-1

1.1.3 卵黄抗体IgY的构成-1

1.1.4 IgY的应用研究-2

 1.2 幽门螺杆菌的治疗现状及其研究进展-2

1.2.1 幽门螺杆菌及其治疗现状-2

1.2.2 IgY抗幽门螺杆菌的研究进展-3

 1.3 本论文研究的主要内容与意义-3

1.3.1 研究内容-3

1.3.2 主要意义-3

2 材料与方法-4

 2.1 材料-4

2.1.1 实验试剂-4

2.1.2 实验器材-5

2.1.3 试剂的配制-6

 2.2 方法-7

2.2.1 卵黄抗体的制备-7

2.2.2 间接酶联免疫法（ELISA）测定效价-8

2.2.3 卵黄抗体纯度测定-9

2.2.4 卵黄抗体稳定性的测定-10

3 结果与分析-11

 3.1 ELISA测定-11

3.1.1 血清中OD值-11

3.1.2 鸡血清的效价滴度-11

 3.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳测定纯度-12

3.2.1 聚丙烯酰胺凝胶电泳图-12

3.2.2 纯化后IgY效价测定-13

3.2.3 纯化的IgY效价滴度-13

 3.3 卵黄抗体稳定性检测-14

3.3.1 温度对IgY的影响-14

3.3.2 pH值对IgY的影响-15

结论-16

致谢-17

参考文献-18