摘要:以灵芝为出发株，进行液体发酵培养，采用海藻酸钠和氯化钙对灵芝细胞进行固定，研究包埋法固定灵芝细胞的工艺条件，探讨固定化培养条件，用苯酚-硫酸法测定多糖含量。结果表明：最佳的固定化条件为海藻酸钠浓度5.0%、氯化钙浓度2.1%、菌胶比1:2；最佳固定化培养条件为pH值8.5多糖产量5.557μg/mL，温度27℃多糖产量7.238μg/mL，培养8d多糖产量5.360μg/mL，保藏时间在1d多糖产量6.103μg/mL，接种固定化小球50个可回收6次。

关键词 灵芝；多糖；固定化；海藻酸钠；氯化钙

目录

摘要

Abstract

1 绪论-2

1.1 灵芝的概况-2

1.2 灵芝的化学成分及活性-2

1.3 灵芝多糖结构及生物活性-3

1.3.1 多糖的结构-3

1.3.2 多糖的生物活性-3

1.4 灵芝多糖提取及检测-3

1.4.1 多糖的提取方法-3

1.4.2 多糖的检测方法-4

1.5 固定化细胞的方法-4

1.5.1 吸附法-5

1.5.2包埋法-5

1.5.3交联法-5

1.5.4共价法-5

1.6包埋法材料的选择及其影响-5

1.6.1包埋法材料-5

1.6.2影响因素-6

1.7研究的目的及意义-6

2 材料与方法-6

2.1 实验材料-6

2.1.1 供试菌株-6

2.1.2 主要药品与仪器-6

2.2 实验方法-8

2.2.1 灵芝菌种的活化培养-8

2.2.2 灵芝固定化工艺-8

2.2.3 灵芝固定化培养-9

2.2.4 多糖的提取与检测-11

3 结果与讨论-12

3.1葡萄糖标准曲线-12

3.2 固定化条件的选择-13

3.2.1 海藻酸钠的浓度对胞外多糖产量的影响-13

3.2.2 氯化钙的浓度对胞外多糖产量的影响-14

3.2.3 菌胶比对胞外多糖产量的影响-16

3.3 固定化培养基条件的选择-17

3.3.1 pH值对固定化灵芝胞外多糖产量的影响-17

3.3.2 温度对固定化灵芝胞外多糖含量的影响-18

3.3.3 培养时间对固定化灵芝胞外多糖产量的影响-19

3.2.4 保藏时间对固定化灵芝胞外多糖产量的影响-20

3.2.5 重复利用次数对固定化灵芝胞外多糖产量的影响-21

结论-23

致谢-24

参考文献-25

附  录-26