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摘要:本文通过从健康鲫鱼肠道内分离细菌菌株,纯化培养各菌株。使用苯酚-氯仿抽提的方法,获得各菌株的基因组DNA。以细菌通用引物8F和1492R通过PCR方法扩增获得各菌株的16S rDNA序列,送到生物公司测序,将序列进行拼接,获得全序列,对菌株进行初步分类。结合实验室以前分离菌株的相关数据和新分离出的菌株,使用16S rDNA序列,确定健康鲫鱼肠道可培养菌株分别属于Aeromonas、Shewanella、Bacillus等,论文将相关菌株的种群特征进行了探讨。
关键词 :鲫鱼;肠道;细菌;种群多样性
目录 摘要 Abstract 1绪论-1 1.1鱼类肠道细菌的研究-1 1.1.1 鱼类肠道细菌的简介-1 1.1.2鱼类肠道细菌的作用-1 1.1.3鱼类肠道菌群的特性、组成及数量-2 1.2 益生菌-2 1.2.1 益生菌对鲫鱼生长的影响-2 1.2.2益生菌的作用-3 1.3 本研究的意义-4 2实验材料和方法-5 2.1实验材料-5 2.1.1菌株来源-5 2.1.2药品-5 2.1.3 试剂-5 2.1.4 实验仪器-5 2.2实验步骤-6 2.2.1培养基的配置-6 2.2.2高压灭菌-7 2.2.3 鲫鱼肠道菌株的分离-8 2.2.4 菌株保藏-8 2.2.5 革兰氏染色和生理生化分析-9 2.2.6提取细菌组DNA为模板-10 2.2.7 进行PCR扩增16SrDNA-11 2.2.8 利用16S rDNA序列进行鉴定-11 2.2.9 确定肠道菌群的分类-11 3实验结果和讨论-13 3.1 分离到鲫鱼肠道可培养菌株-13 3.2 鲫鱼肠道菌株数目的确定-13 3.3 各菌株的16SrDNA序列-13 3.4 鲫鱼肠道菌群多样性特征-16 3.5 讨论-17 结论-18 致谢-19 参考文献-20 |