摘要： 本研究旨在探讨西兰花贮藏期间细菌群落的变化，确定主要腐败菌,为西兰花保鲜提供一个理论基础。用酚氯仿异戊醇法提取菌群的基因组DNA，并通过PCR扩增及DGGE电泳技术探讨其随保存时间延长，菌群结构变化情况。成功提取了菌群基因组DNA，16S rDNA扩增产物为230bp，DGGE电泳结果发现分子指纹图谱上条带存在显著的差异，用bionumberics软件分析DGGE结果，发现第一天和第三天样本的相似度最高为0.93，第五天和第七条也较高为0.83，前三天与后四天相似度为0.74，最后一天与前几天相比最低为0.49。表明蔬菜在储存过程中不断有新的菌种出现，且每隔几天菌群结构就有稍大的变化。

关键词:  微生物群落结构;动态变化;16S rDNA序列分析;聚合酶链式反应;变性梯度凝胶电泳

目录

摘要

Abstract

1. 绪论-1

1.1 研究背景和意义-1

1.2 研究方法原理-2

1.2.1 16S rDNA-2

1.2.2变性梯度凝胶电泳（DGGE）-3

2、实验材料与方法-4

2.1 实验材料-4

2.2 实验仪器与试剂-4

2.2.1主要实验仪器-4

2.2.2 主要实验试剂-4

2.2.3 DGGE配方-4

2.3 实验方法-5

2.3.1基因组 DNA的提取-5

2.3.2菌群16S rRNA基因V3高变区PCR扩增-6

2.3.3DGGE检测-7

3.实验结果与分析-11

3. 1基因组DNA提取-11

3.2蔬菜菌群16S rDNA V3高变区PCR扩增-11

3.3 DGGE电泳图谱-12

3.3.1 DGGE垂直电泳-12

3.3.2 DGGE水平电泳-13

3.4不同时期样本与菌群结构关系的分析-14

4实验结论-15

参考文献：-17

致谢-18