摘要:本文采用细胞固定化技术，利用海藻酸钠和氯化钙固定化亚硝化细菌，探讨了亚硝化细菌富集的方法、固定化培养液的组成、海藻酸钠和氯化钙浓度对固定化细胞的影响。实验结果表明：富集培养基的培养基配方：0.4%（NH4）2SO4，0.1% K2HPO4，0.05% MgSO4，0.2% NaCl，0.04% FeSO4；0.5%：CaCO3，pH为8.0，温度为24℃，并且要定期换掉富集培养液；优化后的固定化培养液以NH4Cl替代(NH4)2SO4，不含NaCl，CaCO3含量增加至1.5%；海藻酸钠最适浓度为4.5%，氯化钙最适浓度为2.0%，亚硝酸盐氮含量最高可达到90.25mg/L。

关键词：亚硝化细菌；固定化；海藻酸钠；氯化钙

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 亚硝化细菌的研究概况-1

1.1.1 亚硝化细菌的分类-1

1.1.2 亚硝化细菌的作用-1

1.1.3亚硝化细菌的应用前景-2

1.2 细胞固定化技术-2

1.2.1 吸附法-2

1.2.2 交联法-3

1.2.3 共价结合法-3

1.2.4 包埋法-3

1.2.4.1 有机高分子载体-4

1.2.4.2 无机载体-4

1.2.4.3 复合载体-4

1.2.5 细胞固定化技术的应用前景-4

1.3 影响包埋发的因素-5

1.3.1 pH-5

1.3.2 温度-5

1.3.3 海藻酸钠的浓度-5

1.3.4 CaCl2的浓度-5

1.3.5 微生物浓度-5

1.4 研究目的及意义-6

2 材料和方法-7

2.1 材料和试剂-7

2.1.1 材料-7

2.1.2 试剂-7

2.1.3 实验设备-7

2.2 试验方法-8

2.2.1 培养基-8

2.2.2 菌种-8

2.2.3 固定化亚硝化菌的制备-8

2.2.4 亚硝酸盐氮绘制标准曲线-8

2.2.5 亚硝酸盐氮的测定—a-萘胺分光光度法-9

2.2.6 氨氮标准曲线的绘制-9

2.2.7 氨氮含量的测定—纳氏试剂分光光度法-10

2.2.8 硝酸盐氮标准曲线的绘制-10

2.2.9 硝酸盐氮的测定—酚二磺酸分光光度法-11

2.2.10 固定化亚硝化细菌的扩大培养-11

3 结果与讨论-12

3.1 固定化亚硝化细菌的富集培养-12

3.1.1 pH-12

3.1.2 溶氧量-12

3.1.3 定期更换培养基-12

3.2 固定化培养基的优化-12

3.3 海藻酸钠浓度对固定化小球形态的影响-13

3.4 CaCl2浓度对固定化小球形态的影响-14

3.5 CaCl2浓度对固定化亚硝化细菌的影响-15

3.6 海藻酸钠浓度对固定化亚硝化细菌的影响-16

结论-19

致谢-20

参考文献-21