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摘要:本文研究了可视化蛋白芯片法快速定量检测牛奶中残留黄曲霉素M1的含量。本实验的原理是采用间接竞争免疫法,首先在芯片上固定了黄曲霉素M1的抗原,然后在芯片反应区内加入黄曲霉素M1抗体和其标准品或待测样品混合物。游离的标准品或待测样品会与固定的黄曲霉素M1抗原竞争结合抗体,待抗原抗体完全反应后加入胶体金标记的羊抗鼠IgG作为二抗和抗体结合,最后加入银增强显色剂进行可视化检测。待显色完毕,用CCD扫描仪扫描芯片得到图像,最后用相关软件提取数据进行定量分析。根据不同浓度的标准品与检测的信号强度作标准曲线,然后通过标准曲线对待测试样中黄曲霉素M1残留量进行定量分析,并与北京勤邦ELISA试剂盒做了比对分析。实验结果表明标准曲线相关系数R2>0.95,样品的加样回收率80%-130%之间,检测限低于0.5ng/ml。 关键词:蛋白芯片;可视化检测;黄曲霉素M1
目录 摘要 Abstract 1 绪论-1 1.1 黄曲霉素的种类和毒性-1 1.2常见的残留生物毒素检测方法-3 1.3展望-7 2 实验材料与方法-8 2.1 实验材料与器材-8 2.1.1 实验仪器及耗材-8 2.1.2 实验试剂-8 2.1.3 主要溶液配制-8 2.2 实验原理及实验方法-8 2.2.1 实验原理-8 2.2.2 实验方法及步骤-9 3 实验结果与讨论-11 3.1 蛋白质方法的条件优化-11 3.1.1黄曲霉素M1材料的筛选-11 3.1.2黄曲霉素M1抗体浓度的筛选-12 3.2 黄曲霉素M1标准曲线的建立-13 3.3 黄曲霉素M1检测限的计算-17 3.4牛奶回收率的计算-20 3.5 准确度实验-22 4 小结-25 参考文献-27 致谢-29 |