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摘要:本文从pH、碳源、氮源、常量元素、微量元素、生长因子、接种量、种龄、转速、温度、时间等方面对类球红细菌发酵生产辅酶Q10的培养基组成和培养条件进行了优化。结果获得了较优的培养基组成为(g/L):葡萄糖4,牛肉膏1,磷酸氢二钾0.9,磷酸二氢钾0.6,无水氯化钙0.075,EDTA 0.02,微量元素溶液10 mL,生长因子溶液10 mL,调节pH 7.0;微量元素溶液配方为(g/L):硫酸锰1.6;生长因子溶液配方为(g/L):维生素B1 1.0,烟酰胺(VPP) 1.0,生物素0.016,对氨基苯甲酸1.0;pH 7.0。较优的培养条件为:种龄24 h;接种量10%;转速180 r/min;发酵温度为32 ℃,发酵/时间为24 h。优化后辅酶Q10的产率较优化前提高了35.1%。
关键词:辅酶Q10;类球红细菌;发酵条件;优化;高效液相色谱
目录 摘要 Abstract 引言 1 材料与方法-5 1.1 实验材料-5 1.1.1 菌种-5 1.1.2主要仪器设备-5 1.1.3主要试剂-5 1.1.4培养基-5 1.2实验方法-5 1.2.1种子培养-5 1.2.2发酵培养-5 1.2.3辅酶Q10提取-6 1.2.4辅酶Q10测定-6 1.2.4.1辅酶Q10标准品溶液制备-6 1.2.4.2辅酶Q10标准曲线的制备-6 1.2.4.3液相色谱条件-6 1.2.4.4试样中辅酶Q10含量计算-6 1.2.5辅酶Q10发酵培养基优化-7 1.2.5.1最适pH优化-7 1.2.5.2最佳碳源选择-7 1.2.5.3最佳氮源选择-7 1.2.5.4碳源含量优化-7 1.2.5.5氮源含量优化-7 1.2.5.6常量元素优化-7 1.2.5.7微量元素优化-7 1.2.5.8生长因子优化-8 1.2.6辅酶Q10发酵培养条件优化-8 1.2.6.1接种量优化-8 1.2.6.2种龄优化-8 1.2.6.3转速优化-8 1.2.6.4发酵时间/温度优化-8 1.2.7发酵条件优化前后对比-8 2.实验结果与分析-8 2.1标准曲线的绘制-9 2.2培养基优化-9 2.2.1 pH优化-9 2.2.2最佳碳源种类优化-10 2.2.3最佳氮源种类优化-10 2.2.4最佳碳源含量优化-11 2.2.5最佳氮源含量优化-11 2.2.6常量元素优化-12 2.2.7微量元素优化-12 2.2.8生长因子优化-13 2.3培养条件优化-13 2.3.1接种量优化-13 2.3.2种龄优化-14 2.3.3转速优化-14 2.3.4时间/温度优化-15 2.4优化前后比对-15 结论 致谢 参考文献 |