摘要：采用超滤、透析、离子交换层析(DEAE-C)、葡聚糖凝胶层析(sepharose G-75)以及DAEA-sepharose fast flow 的方法对克氏原螯虾虾肝中的蛋白质进行分离纯化实验。结果表明：超滤和透析只适合在粗分离时使用，并且超滤比透析所用时间短，适合大量物质分离;在细分离方面，DAEA-sepharose fast flow结合了离子交换层析和葡聚糖凝胶层析两种方法的优点，因此在细分离纯化方面状态下DAEA-sepharose fast flow分离纯化效果最佳、结果最好。

关键词：克氏原螯虾；虾肝；分离纯化；

目录

摘要

Abstract

引言-3

1实验器材-5

1.1实验样品-5

1.2 实验仪器-5

1.3 实验药品和试剂-5

1.4实验预处理-5

2 实验方法-5

2.1超滤-5

2.1.1试剂配制-5

2.1.2操作-6

2.2透析-7

2.2.1试剂配制-7

2.2.2实验原理示意图-7

2.2.3实验操作流程-7

2.3离子交换层析-8

2.3.1溶液配制-8

2.3.2实验原理示意图-9

2.3.3分子量在2～5万样品的离子交换层析-10

2.3.4分子量大于5万样品的离子交换层析-10

2.4葡聚糖凝胶G-75过滤层析-11

2.4.1试剂配制-11

2.4.2实验原理示意图-11

2.4.3实验步骤-12

2.5 DEAE－Sepharose Fast Flow-12

2.5.1试剂配制-12

2.5.2 DEAE－Sepharose Fast Flow操作-13

3实验结果与分析-13

3.1超滤与透析关于蛋白质分离纯化情况的之间的比较-13

3.2离子交换层析对克氏原螯虾虾肝中蛋白质分离情况的比较-14

3.3离子交换层析、葡聚糖凝胶层析、DEAE－Sepharose Fast Flow分离纯化情况的比较-17

4 讨论-19

致谢-19

参考文献-20