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摘要:目的:探讨采用生理盐水匀浆的方法和氯仿/甲醇(体积比2:1)匀浆的方法从小鼠肝脏中提取甘油三酯(Triglyceride,TG)和胆固醇(Cholesterol,TC)的效果比较。 方法:通过对TG和TC标准品的测定制作标准曲线,确定最佳的测定方法;将小鼠肝脏分为两份,一份采用生理盐水匀浆,一份采用氯仿/甲醇匀浆,测定匀浆液中的TG和TC含量,比较两种方法的提取效果,并做回收率试验,比较哪种方法更加可靠。结果:生理盐水匀浆法和氯仿/甲醇匀浆法的提取效果存在显著差异(P<0.05),氯仿/甲醇组TG和TC含量分别为32.9±7.7mg/g和12.9±4.3mg/g。生理盐水组TG和TC含量分别为:15.7±5.6mg/g和7.1±2.0mg/g。氯仿/甲醇组提取效果明显好于生理盐水组(P<0.05)。氯仿/甲醇为匀浆液提取肝脏中的TG和TC的回收率分别为94.86%±14.63%和94.73±5.10%。采用生理盐水为匀浆液提取TG和TC的回收率分别为31.14%±19.16%和35.63%±21.71%。氯仿/甲醇法的回收率明显高于生理盐水法(P<0.05)。 关键词:甘油三酯 胆固醇 氯仿 甲醇
目录 摘要 Abstract 引言1 1 材料和方法 3 1.1 实验材料3 1.1.1 实验仪器 3 1.1.2实验试剂3 1.1.3试剂配制3 1.2 实验方法 4 1.2.1 测定方法的选择 4 1.2.1.1甘油三酯标准曲线的制备4 1.2.1.1.1试剂盒法标准曲线的制备4 1.2.1.1.2乙酰丙酮法标准曲线的制备4 1.2.1.2胆固醇标准曲线的制备 .5 1.2.1.2.1试剂盒法标准曲线的制备5 1.2.1.2.2邻苯二甲醛法标准曲线的制备5 1.2.2提取方法的比较5 1.2.2.1氯仿/甲醇匀浆方法测定TG/TC含量 6 1.2.2.2生理盐水匀浆方法测定TG/TC含量 6 1.2.2.3回收率试验 6 1.2.2.4统计学分析 7 2 实验结果与讨论 7 2.1 实验结果7 2.1.1 标准曲线的结果分析7 2.1.1.1 测定甘油三酯方法的确定 7 2.1.1.2 测定胆固醇方法的确定 8 2.1.2 两种提取方式测定结果 8 2.1.3两种提取方式回收率测定结果 9 2.2结果讨论 9 2.2.1胆固醇、甘油三酯含量测定工作曲线的建立 9 2.2.2两种提取方法对肝脏中甘油三酯含量测定的影响 9 2.2.3两种提取方法对肝脏中胆固醇含量测定的影响 10 2.2.4两种提取方法的回收率比较 11 结论. 13 致谢 . 14 参考文献 . 15 |