摘要：金针菇中含有多种具有生物活性的物质，如核糖体失活蛋白、金针菇毒素等功能性蛋白、多糖、糖蛋白、蛋白聚糖等。本论文之中采用酸性提取法、中性提取法和碱性提取法从金针菇粗粉中来制备金针菇蛋白，通过对酸碱度、提取时间和硫酸铵浓度进行单因素试验，从而确定最佳提取的工艺条件。其结果表明：金针菇蛋白的最佳提取工艺条件为提取时间7h、盐浓度为50%且pH=8，最大值为2.09%。将提取得到的蛋白进行进一步地细胞实验，发现在一定浓度时，提取物对pc12神经胞的生长具有促进作用。

关键词:金针菇蛋白 分离纯化 神经细胞

目录

摘要

Abstract

0 前言-5

0.1 金针菇蛋白质的制备-5

0.2 金针菇蛋白质功能活性-5

0.3 金针菇蛋白质分离纯化和结构鉴定技术-6

0.4 金针菇中蛋白质与学习记忆功能之间的关系-6

0.5 本文中研究的内容-6

1实验的相关材料-6

1.1 实验材料-6

1.2 化学试剂-7

1.3 实验仪器与设备-7

2 实验部分-7

2.1实验方法-7

2.2 对金针菇中蛋白提取率相关影响因素的比较-8

2.2.1 不同盐浓度对其的影响-8

2.2.2  pH的影响对金针菇蛋白相关提取率的影响-8

2.2.3 提取时间对金针菇中蛋白的影响-8

2.3 不同的金针菇蛋白质含量测定方法的比较-9

2.3.1 凯氏定氮法-9

2.3.2 考马斯亮蓝法-9

2.4 不同批次金针菇中蛋白质的含量比较-10

2.5 DEAE纤维素-52离子柱进行分离纯化-10

2.5.1 对DEAE纤维素-52先进行预处理-10

2.5.2 装柱-10

2.5.3 平衡-11

2.5.4 进样-11

2.6 金针菇中蛋白质的红外光谱分析-11

2.7 金针菇中蛋白质的细胞实验-12

2.7.1冻存细胞的复苏-12

2.7.2细胞传代-12

2.7.3铺板-12

2.7.4 MTT法细胞实验-13

3结果与讨论-14

3.1 实验的提取条件对金针菇中蛋白质提取率的影响-14

3.1.1不同盐浓度对金针菇的蛋白质提取率的影响-14

3.1.2 pH值对于蛋白质提取率的影响-15

3.1.3不同的提取时间对蛋白质提取率所具有的影响-15

3.2 金针菇蛋白质的含量测定方法的影响-16

3.3 金针菇的种类对蛋白质含量的影响-16

3.4 DEAE纤维素-52离子柱的分离纯化结果-17

3.5红外光谱的分析结果-17

3.6金针菇蛋白的细胞实验结果-18

4结论-19

参考文献-21