摘要：脂肪氧化酶的活性在植物体的生长发育，成熟以及衰老的过程中有着重要的作用，它是植物体中的营养储存蛋白物质，参与脂类化合物的迁移。然而目前脂肪氧化酶的测定方法存在步骤繁琐，效率低等不足，本实验采用更加高效率的循环伏安法测定脂肪氧化酶的活性，并用正交实验法对脂肪氧化酶的测定条件进行优化。实验得出扫描速率，缓冲液酸度，缓冲液浓度，离子强度等因素对测定的结果影响较大，然而最终循环伏安法所测得的峰电流与脂肪氧化酶的浓度并没有很好的拟合性，同时电化学法测定法也存在着不稳定性的问题，因此，在实际的应用中，通过循环伏安法测定脂肪氧化酶活性的方法还不够成熟。

关键词：脂肪氧化酶  大豆  硼酸-硼砂缓冲体系  正交优化试验  循环伏安法  测定

目录

摘要

Abstract

1 概述-6

1.1食品(谷物)中脂肪氧化酶的研究概况-6

1.2食品(谷物)中脂肪氧化酶种类、含量及分布-6

1.2.1食品(谷物)中脂肪氧化酶的种类-6

1.2.2食品(谷物)中脂肪氧化酶的含量-7

1.2.3食品(谷物)中脂肪氧化酶的分布-7

1.3食品(谷物)中脂肪氧化酶功效-8

1.3.1脂肪氧化酶对食品风味品质的作用-8

1.3.2脂肪氧化酶的其它功效-8

1.4食品(谷物)中脂肪氧化酶的测定方法-8

1.4.1浊度测定法-8

1.4.1.1固体测定体系-8

1.4.1.2液体测定体系-8

1.4.2光谱分析测定法-9

1.4.2.1紫外光谱分析测定法-9

1.4.2.2红外光谱分析测定法-9

1.4.2.3荧光光谱分析测定法-9

1.4.3电化学分析测定法-10

1.4.4酶偶联法-10

1.4.4.1酶偶联比色法-10

1.4.4.2酶偶联电极法-10

1.4.5测pH值法-10

1.4.6其它测定法-11

1.4.6.1胶乳凝集法-11

1.4.6.2电子传导法-11

1.5本项目研究的意义与创新特色-11

2 实验部分-12

2.1材料与设备-12

2.1.1材料与试剂-12

2.1.2设备与仪器-12

2.2实验步骤-12

2.2.1电极的处理-12

2.2.2 Metrohm Autolab NOVA1.10电化学工作站参数设定-13

2.2.3研究电极对循环伏安曲线的影响-13

2.2.4研究缓冲溶液体系对循环伏安曲线的影响-13

2.2.5研究缓冲溶液体系酸度对循环伏安曲线的影响-13

2.2.6研究缓冲溶液体系浓度对循环伏安曲线的影响-14

2.2.7研究离子强度对循环伏安曲线的影响-14

2.2.8研究KCl用量的对循环伏安曲线影响-14

2.2.9研究温度对循环伏安曲线的影响-15

2.2.10研究扫描速率对循环伏安曲线的影响-15

2.2.11研究脂肪酶浓度对循环伏安曲线的影响-15

2.2.12脂肪酶标准曲线的制定-15

2.2.13正交试验的设计-16

2.2.14实样的测定-16

3结果与讨论-17

3.1电极的影响及工作电极的确定-17

3.2缓冲溶液体系的选择-19

3.3缓冲溶液体系酸度的影响及确定-19

3.4缓冲溶液体系浓度的影响及确定-21

3.5离子强度的影响-23

3.6 KCl用量的影响-24

3.7温度的影响及确定-25

3.8扫描速率的影响-26

3.9脂肪酶浓度的影响-28

3.10脂肪氧化酶标准曲线-29

3.11测定条件正交优化实验-30

3.12实样的测定效果-34

4结论-36

参考文献-36