[摘要]大豆在我国的种植面积很广，是我国的主要粮食作物。脂肪氧化酶广泛存在于高等植物体内，与植物的生长发育、植物的衰老、脂质过氧化作用和光合作用及其他胁迫反应等有关。关于如何提取纯化大豆中的脂肪氧化酶一直是个热门的课题，本实验中以大豆为原料进行提取，对于双水相体系提取脂肪氧化酶的可行性进行了实验，考察了不同双水相体系、聚乙二醇PEG分子量、PEG浓度、磷酸盐组成和外加盐NaCl浓度对大豆脂肪氧化酶分配系数的影响，并用响应面实验法对提取大豆中脂肪氧化酶工艺进行优化。 得出当PGE2000加入量为20%，超声波时间为34.22min，料液比为1:20时，大豆脂肪氧化酶的提取效率最高，为97.33%。

[关键词]脂肪氧化酶；大豆；双水相；中心组合试验；响应面分析

目录

摘要

Abstract

1 概述-5

1.1 萃取法-5

1.2 浸提法-5

1.3 盐析法-6

1.4 透析法-6

1. 5 凝胶过滤法-7

1. 6 共沉淀法-7

1. 7 大孔吸附树脂法-7

1. 8 双水相萃取法-8

1. 9 双水相萃取法的特点-9

2 实验部分-9

2.1 材料与设备-9

2.1.1 材料与试剂-9

2.1.2 设备与仪器-10

2.2 实验方法-10

2.2.1 脂肪氧化酶的提取与纯化-10

2.2.2 脂肪氧化酶活性的测定-11

2.2.3 双水相相图的绘制-11

2.2.4 双水相萃取的操作方法-11

2.2.5 双水相萃取单因素实验方法-12

2.2.5.1 不同分子量PEG对分配系数、相比及回收率的影响-12

2.2.5.2 不同PEG浓度对分配系数、相比及回收率的影响-12

2.2.5.3 不同磷酸盐组成对分配系数、相比及回收率的影响-13

2.2.5.4 不同外加盐NaCl浓度对分配系数、相比及回收率的影响-13

2.2.6双水相萃取的优化实验设计及实验操作方法-13

3 结果与讨论-14

3.1 不同双水相相图的绘制-14

3.2 不同双水相组成体系对分配系数、相比及回收率的影响-19

3.3  PEG分子量对分配系数、相比及回收率的影响-19

3.4 PEG浓度对分配系数、相比及回收率的影响-20

3.5 磷酸盐组成对分配系数、相比及回收率的影响-21

3.6 外加盐NaCl浓度对分配系数、相比及回收率的影响-22

3.7 响应面优化实验结果与分析-23

3 结论-25

参考文献：-26