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摘要:以银杏叶提取物为实验材料,通过醇沉法、大孔树脂吸附法和超滤法对银杏叶提取物中的蛋白质进行脱除并比较分析。醇沉法通过测定不同体积分数的乙醇对银杏叶提取物中蛋白质的脱除效果进行探讨,确定了最佳纯化工艺条件;大孔树脂吸附工艺中对大孔树脂种类、树脂用量、料液浓度、吸附流速等影响银杏叶提取物纯化的因素进行了探讨,确定了最佳纯化工艺条件;超滤法通过测定不同的膜孔径对银杏叶提取物中蛋白质的脱除效果进行了探讨,确定了最佳纯化工艺条件。结果表明:大孔树脂吸附法对蛋白质脱除效果最好,其中树脂LX-5对蛋白质的脱除能力较好;采用LX-5树脂对银杏叶提取物中的蛋白质进行脱除和纯化银杏叶提取物,最佳的脱除条件为:树脂的用量为25 g,以蛋白质浓度为0.27 mg/mL的银杏叶提取物溶液60 mL用0.4 mL/min的速度进行吸附,吸附效果达到95.55%。
关键词 银杏叶提取物;蛋白质;醇沉;大孔吸附树脂;超滤
目录 摘要 Abstract 1 绪论-1 1.1 组成成分-1 1.2 药理活性-1 1.2.1 改善心脑血管的循环及保护脑和其他组织缺血-1 1.2.2 拮抗血小板活化因子(PAF)作用-2 1.2.3 保护中枢神经系统作用-2 1.2.4 清除自由基及抗氧化作用-2 1.2.5 其他作用-2 1.3 中药注射剂而引起的不良反应-2 1.3.1过敏反应-3 1.3.2 疼痛-3 1.3.3 溶血-3 1.4 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量-3 1.5 GBE中蛋白质的脱除方法-3 1.5.1 醇沉法-3 1.5.2 大孔树脂吸附法-4 1.5.3 超滤-5 1.6 实验目的及意义-5 2 材料与方法-7 2.1 仪器与试剂-7 2.1.1 主要仪器-7 2.1.2 主要试剂-7 2.1.3 主要原材料-7 2.2 银杏叶提取物中蛋白质的检测-7 2.2.1 标准蛋白质溶液的制备-7 2.2.2 考马斯亮蓝G-250试剂的制备-8 2.2.3 标准曲线的制备-8 2.2.4 样品的测定-9 2.3 实验方法-9 2.3.1 醇沉法脱除银杏叶提取物中的蛋白质-9 2.3.2 大孔树脂吸附法脱除银杏叶提取物中的蛋白质-9 2.3.3 超滤法脱除银杏叶提取物中的蛋白质-10 2.3.4 计算方法-10 3 结果与分析-12 3.1 醇沉法脱除银杏叶提取物中的蛋白质-12 3.2 大孔树脂吸附法吸附银杏叶提取物中的蛋白质-12 3.2.1 不同树脂对蛋白质吸附性能的比较情况-12 3.2.2 不同树脂用量对蛋白质吸附性能的比较-13 3.2.3 不同料液浓度蛋白质吸附性能的比较-14 3.2.4 不同上柱速率对蛋白质吸附性能的比较-15 3.2.5 大孔树脂纯化正交实验-16 3.3 超滤法脱除银杏叶提取物中的蛋白质-17 3.4 醇沉法、大孔树脂吸附法和超滤法脱除蛋白质的比较-18 结论-19 致谢-20 参考文献-21 |