摘要:小球藻广泛存在于水体中，是一种光能自养型微生物，其在功能食品﹑医疗﹑环境保护和生物能源等领域得到应用。大量澡体的获得是小球藻开发和利用的前提，因此，小球藻大规模培养成为重点。

本论文以自养小球藻培养为基础，在实验室内研究枯草芽孢杆菌对小球藻自养情况下生长的影响，通过对小球藻叶绿素a含量的测定反映出小球藻的生长情况。微藻中的叶绿素a的提取可以采用超声波-乙醇提取法进行提取，叶绿素a含量通过分光光度法测定。经过十天培养后，对照组小球藻叶绿素a的含量为13.5582微克/升，实验组小球藻叶绿素a的含量为14.6439微克/升。数据显示，一定量的枯草芽孢杆菌对小球藻封闭式自养有促进作用。对与枯草芽孢杆菌混合培养的小球藻进行油脂提取，从1.0354克干藻体中得到0.1975克的油脂，油脂得率为19.07%，与对照组20%相比差别不大。此研究为封闭式自养培养小球藻提供帮助，有助于小球藻大规模培养的实现。

关键词:小球藻；枯草芽孢杆菌；共生；叶绿素a；油脂

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1小球藻简介-1

1.2小球藻应用-1

 1.2.1 食品医疗保健-1

 1.2.2 生物柴油-1

 1.2.3 环境保护-2

1.3 小球藻培养方式-2

 1.3.1开放式光自养-2

 1.3.2封闭式异养-2

 1.3.3自养-异养混合培养-3

1.4枯草芽孢杆菌-3

1.5共生关系-3

2实验材料与方法-5

2.1实验试剂和仪器-5

 2.1.1 实验试剂-5

 2.1.2 实验仪器-6

2.2培养基的配置与灭菌-6

 2.2.1 LB培养基-7

 2.2.2 BG-11培养基-7

 2.2.3高压蒸汽灭菌-8

2.3 枯草芽孢杆菌培养-8

 2.3.1 枯草芽孢杆菌活化-8

 2.3.2 枯草芽孢杆菌培养-8

 2.3.3 枯草芽孢杆菌菌种保藏-8

 2.3.4 枯草芽孢杆菌计数-9

2.4 小球藻培养及计数-9

 2.4.1 小球藻培养-9

 2.4.2 小球藻计数-9

2.5 枯草芽孢杆菌-小球藻混合培养-10

2.6小球藻叶绿素a的提取与测定-10

 2.6.1有机溶剂超声波提取法-11

 2.6.2分光光度法测定叶绿素a的含量-11

 2.6.3小球藻生长曲线的绘制-12

2.7小球藻油脂含量测定-12

3 实验结果与讨论-14

3.1实验结果-14

 3.1.1枯草芽孢杆菌的活化和单菌落-14

 3.1.2枯草芽孢杆菌平板菌落计数-14

 3.1.3小球藻血球计数板计数-15

 3.1.4小球藻生长曲线-15

 3.1.5小球藻油脂含量测定-16

3.2讨论-17

 3.2.1无菌操作工作台中操作过程注意事项-17

 3.2.2智能光照培养箱-17

 3.2.3分光光度计使用注意事项-17

 3.2.4藻共生促生菌-18

结论-19

致谢-20

参考文献-21