摘要:本实验使用中药材合欢皮、夜交藤两种药材为培养基质进行固体发酵生产灵芝菌质，运用单因素实验确定装瓶量、固液比和药材比继而用响应面进行回归模型优化工艺发酵，对此优化条件进行多次实验。结果显示：在单因素实验中，最佳固液比是1.25 g/mL时多糖和三萜量分别是137.76 mg/g，131.21 mg/g；装瓶量是0.24 g/mL时达到最高点，多糖和三萜含量分别是152.57 mg/g，139.74 mg/g；药材比是0.5（合欢皮与夜交藤质量比）时达到最高点，多糖和三萜含量分别是138.24 mg/g，130.75 mg/g；培养时间是35 d时达到最高点，多糖和三萜含量分别是130.74 mg/g，138.55 mg/g。在响应面分析中，合欢皮和夜交藤固体发酵灵芝在最佳条件下，即固液比1.17 g/mL，装瓶量0.2136 g/mL，药材比例1.93（夜交藤与合欢皮的比例），多糖含量预测最大值是152.929 mg/g。在显著性分析中，灵芝菌质多糖含量是153.56 mg/g，而合欢皮多糖含量是151.14 mg/g，夜交藤的多糖含量是181.57 mg/g。合欢皮和夜交藤培养基长出灵芝菌质测出的多糖和三萜类含量和这两种药材本身相比较存在差异。

关键词：灵芝；合欢皮；夜交藤；固体发酵；多糖；响应面法

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1合欢皮的概况及活性成分-1

1.2夜交藤的概况及活性成分-1

1.3灵芝的概况-2

1.4灵芝多糖-2

1.4.1灵芝多糖组成-2

1.4.2灵芝多糖作用-2

1.5灵芝三萜化合物-3

1.5.1灵芝三萜组成-3

1.5.2灵芝三萜作用-3

1.6固体发酵技术-4

1.6.1固体发酵技术的产生与发展-4

1.6.2固体发酵的现状及成果-4

1.6.3真菌固体发酵的优势-5

1.7本课题研究的背景和意义-6

2材料和方法-7

2.1 实验试剂与仪器-7

2.1.1材料与试剂-7

2.1.2 实验仪器-7

2.2 实验方法-8

2.2.1培养基的配制-8

2.2.2灵芝菌种的活化-8

2.2.3灵芝合欢皮与夜交藤培养基配置-8

2.3单因素试验-8

2.3.1固液比-8

2.3.2装瓶量-8

2.3.3药材比-9

2.4葡萄糖标准曲线制作-9

2.5齐墩果酸标准曲线制作-10

2.6 多糖和三萜的提取与检测-10

2.6.1多糖的提取-10

2.6.2多糖的检测-10

2.6.3三萜的提取-10

2.6.4三萜的检测-11

2.7 Box-Behnken试验设计-11

2.8 数据分析-11

3结果与讨论-12

3.1固液比的确定-12

3.2 装瓶量的确定-12

3.3药材比例的确定-13

3.4培养时间的确定-13

3.5 Box-Behnken试验设计-14

3.6 回归模型的建立和检验-15

3.7 两因素间的交互效应分析-15

3.8 最佳条件优化及验证结果-15

3.9多糖含量比较-15

结论-15

致谢-15

参考文献-15