摘要:本文采用固定化细胞技术，利用聚乙烯醇和海藻酸钠联合固定化假丝酵母菌，探讨了聚乙烯醇的浓度，海藻酸钠的浓度，氯化钙的浓度及聚乙烯醇与海藻酸钠的质量比对固定化假丝酵母与3-羟基丙酸产量的影响。实验结果表明：

当聚乙烯醇浓度小于10.0%时，固定化小球透明度较高，硬度较低；大于10.0%时，固定化小球颜色透明度较低，硬度较高；等于10.0%时，固定化小球透明度适中，硬度适中，成球形无拖尾。当海藻酸钠浓度小于1.0%时，固定化小球透明度较高，硬度较低；大于1.0%时，固定化小球颜色透明度较低，硬度增加明显；等于1.0%时，固定化小球透明度适中，硬度适中，成球形无拖尾。当氯化钙浓度低于2.1%时，固定化小球透明度较高，硬度很低；大于2.1%时，固定化小球透明度较低，硬度较高；等于2.1%时，固定化小球透明度适中，硬度适中，成球型无拖尾。

随着聚乙烯醇浓度的增加，3-羟基丙酸含量先增加后减少，10.0%的聚乙烯醇为最佳浓度，此时3-羟基丙酸的含量为20.01±0.66 g/L。.随着海藻酸钠浓度的增加，3-羟基丙酸含量先增加后减少，1.0%的海藻酸钠为最佳浓度，此时3-羟基丙酸的含量为20.01±0.66 g/L。随着氯化钙浓度的增加，3-羟基丙酸含量先增加后减少，2.1%的氯化钙为最佳浓度，此时3-羟基丙酸的含量为20.01±0.66 g/L。

聚乙烯醇和海藻酸钠联合固定假丝酵母最佳工艺为：10.0%的聚乙烯醇，1.0%的海藻酸钠和2.1%的氯化钙最。在此条件下3-羟基丙酸含量为20.01±0.66 g/L。

关键词：固定化；假丝酵母菌；最佳工艺；3-羟基丙酸

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

 1.1 假丝酵母菌的概况-1

 1.2  3-羟基丙酸的概况-1

 1.2.1 3-羟基丙酸的定义-1

 1.2.2 3-羟基丙酸的生产-1

 1.2.2 3-羟基丙酸的测定方法-1

 1.3 固定化技术-2

1.3.1 吸附法-2

1.3.2 交联法-3

1.3.3 共价结合法-3

1.3.4 包埋法-3

 1.4 固定化细胞载体-4

1.4.1 有机高分子载体-4

1.4.2 无机载体-4

1.4.3 复合载体-4

 1.5 聚乙烯醇、海藻酸钠联合固定化-4

1.5.1 海藻酸钠浓度-5

1.5.2 聚乙烯醇浓度-5

1.5.3 CaCl2浓度-5

 1.6 固定化细胞技术发展及前景-5

 1.7 研究目的及意义-5

2 材料和方法-7

 2.1 材料和试剂-7

2.1.1 材料-7

2.1.2 试剂-7

2.1.3 实验设备-7

 2.2 试验方法-7

2.2.1 培养基-8

2.2.2 假丝酵母的扩大化培养-8

2.2.3 固定化小球的制备-8

2.2.4 固定化假丝酵母菌最适聚乙烯醇浓度-8

2.2.5 固定化假丝酵母菌最适海藻酸钠浓度-8

2.2.6 固定化假丝酵母菌最适氯化钙浓度-8

2.3 3-羟基丙酸的测定-8

2.3.1 3-羟基丙酸制标准曲线-8

2.3.2样品中3-羟基丙酸的测定-9

3 结果与讨论-10

3.1 高效液相色谱条件的确定-10

3.2 3-羟基丙酸标准曲线-10

3.3 聚乙烯醇浓度确定-11

3.4 海藻酸钠浓度确定-12

3.5 氯化钙浓度确定-13

3.6 样品3-羟基丙酸的测定-13

3.7 不同聚乙烯醇浓度3-羟基丙酸含量-14

3.8 不同海藻酸钠浓度3-羟基丙酸含量-15

3.9 不同氯化钙浓度3-羟基丙酸含量-15

3.10 最佳培养条件-16

结论-17

致谢-18

参考文献-19